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實(shí)驗(yàn)室滅菌有哪幾種方法,各有什么特點(diǎn)

發(fā)表時(shí)間: 2024-08-15

實(shí)驗(yàn)室對換將要求一向極高,面對實(shí)驗(yàn)室中產(chǎn)生的諸多細(xì)菌,會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室有效實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)偏差,那么如何消除實(shí)驗(yàn)室的細(xì)菌,今天就來學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室滅菌的有有效方法,我們看看有哪幾種。

實(shí)驗(yàn)室滅菌有哪幾種方法,各有什么特點(diǎn)

1、高壓蒸汽滅菌

為濕熱滅菌方法的一種。是微生物培養(yǎng)中最重要的滅菌方法。這種滅菌方法是基于水在煮沸時(shí)所形成的蒸汽不能擴(kuò)散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密閉的情況下,隨著水的煮沸,蒸汽壓力升高,溫度也相應(yīng)增高。(PV=nRT)高壓蒸汽是最有效的滅菌法,能迅速地達(dá)到完全徹底滅菌。一般在15磅/英寸2壓力下(121.6℃),15~30分鐘,所有微生物包括芽孢在內(nèi)都可殺死。它適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌。

進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的容器是高壓蒸汽滅菌鍋。高壓蒸汽滅菌鍋是一個(gè)能耐壓又可以密閉的金屬鍋,有立式與臥式兩種。

可以用電熱、煤氣、蒸汽等。鍋上裝有壓力表,有的還裝有溫度計(jì),能及時(shí)了解鍋內(nèi)壓力及溫度。鍋上還設(shè)有排氣口,其作用是在密閉之前,利用蒸汽將鍋內(nèi)的冷空氣排凈,另外還裝有安全活門,如果壓力超過一定限度,活門即可自動打開,放出過多的蒸汽。

2、干熱滅菌

微生物培養(yǎng)中常用的干熱滅菌是指熱空氣滅菌。一般在電烘箱中進(jìn)行。干熱滅菌所需溫度較濕熱滅菌高,時(shí)間也較濕熱滅菌長。這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在干燥無水的情況下不容易凝固。一般須在160℃左右保持恒溫3~4小時(shí),方能達(dá)到滅菌的目的。干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌,凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基,都不能進(jìn)行干熱滅菌。

3、間歇滅菌

各種微生物的營養(yǎng)體在100℃溫度下半小時(shí)即可被殺死。而其芽孢和孢子在這種條件下卻不會失去生活力。間歇滅菌就是根據(jù)這一原理進(jìn)行的。間歇滅菌的方法是用100℃、30分鐘殺死培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的營養(yǎng)體,然后將這種含有芽孢和孢子的培養(yǎng)基在溫箱內(nèi)或室溫下放置24小時(shí),使芽孢和孢子萌發(fā)成為營養(yǎng)體。這時(shí)再以100℃處理半小時(shí),再放置24小時(shí)。如此連續(xù)滅菌3次,即可達(dá)到完全滅菌的目的。間歇滅菌通常在流動蒸汽的滅菌鍋中進(jìn)行,也可用普通鋁鍋代替。這種滅菌方法多用于明膠、牛乳等物質(zhì)的滅菌,這類物質(zhì)在100℃以上的溫度下處理較長時(shí)間,會被破壞,而用間歇滅菌法就既起到了殺菌作用,又使被處理的物質(zhì)免遭破壞。

4、紫外線滅菌

紫外線殺菌力最強(qiáng)的是波長2650~2660?(10-1nm)的部分。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。無菌室和緩沖間的照射時(shí)間為20~50分鐘(視房間大小而定),接種箱照射10~15分鐘即可。為了加強(qiáng)紫外線滅菌的效果,在照射前,可在無菌室、緩沖間或接種箱內(nèi)噴灑5%石炭酸,以使空氣中附著有微生物的塵埃降落,同時(shí)也可以殺死一部分微生物。無菌室的工作臺的臺面和椅子,可用2~3%的來蘇兒擦洗。然后再照射紫外線。由于紫外線對人體有傷害作用,所以人不要直視正在照射的紫外線燈,也不要在照射情況下進(jìn)行工作。

滅菌后,為了檢驗(yàn)紫外線的滅菌效果,可以在無菌室、緩沖間或接種箱內(nèi)放一套盛有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿,將皿蓋打開5~10分鐘,蓋好后,放入溫箱中培養(yǎng)。如果只有一、二個(gè)菌落,可認(rèn)為滅菌效果良好。如雜菌叢生。則需延長照射時(shí)間或同時(shí)加強(qiáng)其它滅菌措施。

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